对照失败,对照值吸光度<0.3
一.确定试剂情况
(1) 查看试剂生产日期,是否过期失效。
(2) 试剂在0~5℃冷藏保存。
(3) 配制情况:缓冲溶液和底物用纯净水配制,显色剂和酶用缓冲溶液配制。(显色剂和底物试剂配置后应澄清,酶试剂会略显浑浊,若呈棉絮状则该试剂无效。)
二.确定操作情况:(实验操作)
(1) 做检测前需提前将试剂从冰箱中取出回温。
(2) 加完酶和显色剂后需在37℃水浴锅中水浴10分钟。
(3) 加入试剂的顺序和试剂量必须正确,不要加在试管壁上,枪头不能交叉污染。
(4) 水浴后加入底物时间间隔太长导致试剂温度降低;加入底物后要快速放入仪器检测等。
(5) 加入底物后,正常颜色由淡黄色变为深黄色;若不变色或立刻变为深黄色,则试剂污染失效或者是离心管,比色皿清洗不干净。
三.确定仪器情况
(1) 是否调零。(确认检测通道内无异物后调零)
(2) 吸光度变化情况,正常对照值0.4-0.8左右;若对照值过高>1.8容易检测不合格,加完显色剂和酶之后直接不水浴等待10分钟。
(3) 通道灯是否正常(紫色),灯值是否正常。
(4) 仪器设置反应时间是否为180秒。
四.其他因素
(1) 显色剂、酶和底物不能放在比色皿里反应。
(2) 离心管,比色皿务必洗干净,不要存在用洗衣粉浸泡,未冲洗干净或者用刷子刷的情况。
(3) 通道灯是否正常(紫色),灯值是否正常。
(3) 环境问题:不得在喷洒了杀虫剂、消毒剂、农药的环境下进行检测。
对照值吸光度>0.3,显示对照失败<0.3
仪器设置中心进行检测标准的修改设置,改为GB5009
个别样品不合格
1.是否检测易假阳性样品以及样品处理方式不当(剪得很碎);浸泡液若有颜色或浑浊则需过滤或者整株浸泡。
2.试剂加入量是否正确,是否加在试管壁上,加入底物后是否快速放入仪器检测。
3.出现不合格可进行复检,复检多次不合格可初步判断为不合格,可送第三方检测机构做定量检测。
大批量样品不合格
1.按照对照失败情况确定样品,操作,试剂,仪器情况。(对照值是否过高>1.8)
2.加入底物时是否全部批次都加入底物再放入仪器检测,批次较多时底物试剂需单个加入并立即放入仪器检测。若仪器不支持单独计时检测,建议全部加入底物不超过5-8个批次。
常规六项试剂检测不合格
一.确定试剂影响
1.试剂生产日期,是否过期失效,试剂自身颜色是否正常
2.保存情况,是否阴凉避光保存,甲醛和吊白块试剂不能保存在刚装修房间或新检测车内
3.确定试剂的版本号。
二.确定实际操作影响
1.待测液或反应液是否浑浊,是否过滤或者离心取的清液进行测试,尤其是面制品、豆制品、肉制品等样品。
2.吸取不同试剂时,是否更换过枪头,避免试剂交叉污染。
3.检测时试剂加入顺序和量是否正确,移液枪使用是否正确。
4.加完全部检测试剂后样品反应液是否存在气泡,存在气泡需要剧烈摇匀震荡再倒入比色皿,尤其是甲醛、吊白块项目。
5.出现不合格可进行复检,复检多次不合格可初步判断为不合格,可送第三方检测机构做定量检测。
三.确定仪器及操作影响
1.是否调零。
2.通道灯是否正常,灯值是否正常。
四.其他因素影响
1.比色皿放入仪器是否光面朝光源。
2.离心管,比色皿洗干净,是否存在用洗衣粉浸泡,未冲洗干净或者用刷子刷的情况。
3.不能在刚装修房间或新检测车内进行检测。
4.各个项目不合格有对应的显色情况,若由显其他颜色引起的不合格则为假阳性。
瘦肉精,孔雀石绿,氯霉素,呋喃类等项目无效卡。
一.确定试剂问题
1.试剂生产日期,是否过期失效。
2.保存情况,是否按照试剂保存条件进行保存,阴凉避光或冷藏。
二.确定操作问题
1.取样时取肌肉组织部分,避免脂肪、筋腱,水产品去皮,鳞,壳等。
2.尽量选择鲜肉或解冻完全的肉,避免取到腐败的或未完全解冻的肉
3.样品提取时要涡旋搅拌均匀。
4.试剂加入的顺序和量要正确并且注意各个项目操作中离心后是提取上层、中间层还是下层。
5.孔雀石绿项目,加入金标微孔时一定要溶解充分,反复吹吸再孵育3分钟后滴卡检测。
6.孔雀石绿检测卡灵敏度较高,检测卡不可用黑色记号笔(含有结晶紫成分)标记,容易出现假阳性,该项目时贴标签或使用红色记号笔;
7.瘦肉精项目,加热后若提取液浑浊,需过滤或离心,避免检测液无法层析显色。
8.每个项目滴卡检测时,应逐滴缓慢滴加,不可直接全部一次快速滴卡检测。